珍藏我们 在线订购

产物挑选指南

K7

机构用户解决方案

当前位置:> > > > Capturem Trypsin
Capturem Trypsin
品牌 Code No. 包装量 价钱 说明书 数目
Clontech 635722 20 rxns 3,155 元
 
■ 产品简介
蛋白质量谱分析前的样品消化步调,一般需求4个小时以至留宿,若是运用Capturem Trypsin 或 Capturem Pepsin,可正在室温下快速,高效和完整的消化蛋白质,从而使蛋白质组学剖析流程越发联贯。这两款产物是一次性小型离心柱的情势,运用新型膜技术,膜上流动有胰蛋白酶(Trypsin)或胃蛋白酶(Pepsin),正在短短几分钟内便可高效、完整天酶解蛋白质样品,取传统的溶液法留宿处置惩罚比拟,工夫更短、效力更高、重复性更好、胰蛋白酶自溶片断更少,制止发作过分消化。
 
■ 快速、简朴的操纵流程
Capturem Trypsin 和 Capturem Pepsin包罗小型离心柱和活化buffer,操纵流程简朴、快速,只需求到场200 μl活化buffer离心1 min,然后到场蛋白质样品再离心1 min,便可洗脱得到可用于下流剖析的肽段。
 
 
■ 产物特性
·操纵快速,2 min-3 min内便可酶解蛋白质样品,无需留宿处置惩罚
·比溶液法效力更高,酶解更完全
·样品中自溶片断更少,蛋白质非特同性润饰几率更低
·能够使全部蛋白质组学剖析流程越发联贯,实现更有用的肽和蛋白质的量谱审定
 
■ 运用
·蛋白质审定
·蛋白质组学剖析
·量谱样品制备
·抗体审定
 
■ 实行例
 
葡京网站网址
运用Capturem Trypsin对BT474齐细胞裂解液停止酶解消化并做蛋白质组学剖析。经由过程RP-HPLC将裂解液分红19个自力的组分(图A),然后再运用Capturem? Trypsin对每一个组分零丁酶解,并运用LC/MS-MS剖析,每一个组分中带有2个或以上的特异性肽段的蛋白质总数被审定并绘制出,如B图所示。
 
运用Capturem Trypsin能够实现快速完整的Apomyoglobin(Apo)酶解。上图为运用RP-HPLC剖析Capturem? Trypsin和通例溶液法酶解蛋白质的效果,图A为未酶解的完好蛋白质,图B为溶液法室温酶解16 h的蛋白质,图C为运用Capturem? Trypsin酶解1 min的蛋白质,效果显现运用Capturem? Trypsin酶解的异常完全。
 
运用Capturem Trypsin能够酶解严密折叠的蛋白质Myoglobin (Myo)。运用RP-HPLC对Capturem? Trypsin和通例溶液法酶解的产品停止剖析,图A为未酶解的完好蛋白质,图B为溶液法室温酶解16 h的蛋白质,图C为运用Capturem? Trypsin酶解1 min的蛋白质,效果显现运用Capturem? Trypsin能够快速有效地酶解严密折叠的蛋白质。
 
葡京国际厅
Capturem Pepsin的操纵流程。正在酶消化之前,抗体样品被变性和复原。运用附带的活化buffer首次活化柱子后,将复原处置惩罚后的抗体样品溶液(50-800 μl)到场离心柱中,离心1分钟。 正在这个历程中,柱上发作胃蛋白酶消化,随后再一次离心洗脱便可得到肽片断,到场NaOH中和洗脱的肽片断,便可用于下流剖析。
 
运用Capturem Pepsin消化差别的小鼠抗体同种型。小鼠的IgG1, IgG2a, IgG2b, 和 IgG3各与
100 μg,运用TCEP和醋酸于75℃处置惩罚15 min停止变性操纵,然后用5%甲酸buffer稀释。运用Capturem Pepsin对稀释的样品停止消化,经由过程SDS-PAGE对消化和已消化的样品(各与4 μg)停止检测,如上图所示。
 
差别批次的Capturem Pepsin消化产品HPLC图谱对照。运用5%的甲酸稀释50 μg的Apo,挑选3个差别批次的Capturem Pepsin对其停止消化,HPLC效果显现三组消化产品具有雷同的片断,阐明Capturem Pepsin具有优越的重复性。
 
Capturem Pepsin取pepsin溶液法消化效果对照。对50 μg 的anti-HER2单克隆抗体运用3种要领停止消化,分别是Capturem Pepsin,pepsin溶液法孵育4小时,pepsin溶液法孵育留宿。然后停止量谱分析。由上图能够看出,运用溶液法的消化产品峰左移而且整体峰的数目较多,阐明发生了过分消化,而运用Capturem Pepsin则没有这个问题。
 
 
产物详情请点击以下链接: